學位論文

Permanent URI for this collectionhttp://rportal.lib.ntnu.edu.tw/handle/20.500.12235/73908

Browse

Subject: search.filters.subject.histone deacetylase inhibitor

Search Results

Now showing 1 - 2 of 2
  • No Thumbnail Available
    Item
    建立小腦脊髓運動失調症第三型的細胞誘導表現模式系統作為藥物篩選平台
    (2010) 顏孝修; Hsiao-Hsiu Yen
    小腦脊髓運動失調症第三型(Spinocerebellar ataxia type 3, SCA3)，又名為Machado-Joseph disease (MJD)，是種自體顯性的遺傳疾病，SCA3為小腦脊髓運動失調症眾多型中發生率最高的亞型。SCA3主要為位於染色體第14對長臂(14q24.3-q31)上的MJD1基因發生CAG三核苷酸重複序列的異常擴增突變所致，進而造成轉譯出含有異常麩醯胺酸重複(polyglutanine, polyQ)區域的ataxin-3蛋白(AT3)。AT3蛋白中的polyQ區域發生的擴增現象，同樣亦被發現於八種其他polyQ相關的神經退化性疾病中，然而對於polyQ蛋白產物之致病機轉則尚未十分明瞭。目前研究發現帶有異常擴增polyQ的AT3蛋白，可造成蛋白折疊的不穩定性增加，進而在神經細胞核與細胞質中產生蛋白堆積，形成細胞內含體(inclusion bodies)。為進一步研究AT3蛋白對於SCA3造成之神經致病機轉以及作為潛力藥物篩選平台，我們建立了AT3誘導表現的PC12細胞模式。從實驗結果發現，帶有異常擴增polyQ區域的AT3蛋白經由誘導表現後，於分化後PC12細胞的細胞核內與周圍，出現聚集性的內含體，我們並且觀察到ubiquitin亦共同存在於AT3內含體中的現象，顯示ubiquitin-proteasome system (UPS)的運作與SCA3神經退化性疾病有密切的關連性。我們也發現帶有致病範圍CTG擴增的AT3蛋白，對於分化的PC12細胞會造成神經毒性，導致細胞型態分化不健全，對於氧化壓力的抵禦敏感力亦降低，進而造成細胞存活率下降。在藥物投藥劑量試驗中，我們針對組蛋白去乙醯酶抑制劑(histone deacetylase inhibitor, HDACi)及抗氧化性藥物來評估其神經保護效果，結果顯示HDACi可有效維持細胞存活率，由此可推論基因表現調控參與SCA3病理機制的重要性。依據這些研究結果，希望可藉由此AT3誘導表現細胞模式，提供更多有關於SCA3的分子致病機制資訊，亦可幫助對於polyQ相關的神經退化性疾病之了解，並作為藥物篩選平台，發展出具潛力的治療性藥物與方法。
  • No Thumbnail Available
    Item
    以初級培養與小鼠模式確認對阿茲海默氏症有潛力之HDAC抑制劑
    (2016) 黃莘淯; Huang, Hsin-Yu
    阿茲海默氏症(Alzheimer’s disease, AD)為一種常見的神經退化性疾病伴隨著出現認知功能的障礙。其病理特徵主要包括了由tau蛋白過度磷酸化所導致的神經纖維糾結(neurofibrillary tangles, NFTs)、β類澱粉蛋白質(β-amyloid peptide; Aβ)堆積造成的類澱粉斑塊(plaques)以及神經的死亡，截至目前均沒有治療的方法。表觀遺傳(Epigenetics)中組織蛋白乙醯化(histone acetylation)以及去乙醯化(histone deacetylation)能夠調控基因的表達；透過組織蛋白去乙醯(histone deacetylase, HDAC)會將組織蛋白乙醯基團移除使組織蛋白更緊密地和DNA結合，並且抑制基因的轉錄進而導致疾病的產生，而組織蛋白去乙醯酶抑制劑(histone deacetylases inhibitor, HDACi)能夠改善基因轉錄的抑制，並且已被報導在多種神經退化性疾病中扮演神經保護的作用。在本研究中，我們將Aβ25-35寡聚體藥物施於初級海馬迴神經細胞培養中造成細胞毒性以篩選具有神經保護功效之HDACi，並將有效的HDACi施用於AD小鼠驗證其可緩解神經退化之效果，透過此研究找到有潛力之HDACi，並了解分子作用機制。 在初級細胞離體實驗中我們發現NC106藥物可以增加神經突起長度(neurite length)以及神經突起分枝(branch)的數目，而且進一步發現高劑量的NC106神經保護效果較低劑量強，因此使用NC106進行動物試驗。從動物實驗中也發現高劑量的NC106在改善焦慮行為及短期記憶方面比低劑量有較強的效果，並且可以減少Aβ堆積、tau蛋白磷酸化、神經發炎反應及增加血清素神經元數目及突觸前蛋白質synaptophysin的表現量以對抗海馬迴CA1急性注射Aβ25-35寡聚體於所造成的傷害。因此，我們認為NC106是一個有潛力的AD治療藥物。